天然化合物Oblongifolin C调节热休克蛋白70抑制肿瘤细胞自噬的机制研究

项目名称： 天然化合物Oblongifolin C调节热休克蛋白70抑制肿瘤细胞自噬的机制研究

项目编号： No.81503102

项目类型： 青年科学基金项目

立项/批准年度： 2016

项目学科： 医药、卫生

项目作者： 王晓宇

作者单位： 上海中医药大学

项目金额： 17.9万元

中文摘要： 细胞自噬信号通路是抗肿瘤药物研发的热点。在前期工作中，我们报道了云南藤黄中的化合物Oblongifolin C（OC）具有通过抑制细胞自噬从而诱导细胞死亡的活性；二维电泳和蛋白质Fishing研究结果显示，OC的可能作用靶点为热休克蛋白（HSP）70。为阐明OC如何调控HSP70蛋白以及HSP70在自噬通路中的作用，本研究将采用BIAcore SPR技术，研究OC与HSP70等热休克蛋白的亲和能力；同时使用凋亡缺失、自噬缺失细胞，结合Western blot，活细胞观察和荧光定量PCR研究OC对HSP70的作用；最后运用CRISPR-CAS9技术建立HSP70基因敲除细胞和动物模型，探讨体内外OC抑制自噬的作用机理。本项目的成果将为OC开发成为新的自噬抑制剂和抗肿瘤药物提供理论依据。HSP70作用的阐明为肿瘤治疗开拓了新的思维方式。

中文关键词： 热休克蛋白；天然化合物；自噬；抗肿瘤

英文摘要： Autophagy is the hotspot in anticancer drug research and development. In our previous studies, we have identified that oblongifolin C (OC), isolated from Garcinia species, could inhibit autophagic flux and activate apoptosis in cancer cells. We also found that OC may target the protein of heat shock protein 70.Our research plan focuses on the mechanism study on oblongifolin C by using multiple techniques, including CRISPR-CAS9,BIAcore SPR,Western Blot, live cell imaging, and real time-PCR. Furthermore, we will investigate the molecular mechanisms underlying anti-tumor of OC in the mice cancer model.We expect OC can be a novel autophagic flux inhibitor and may be potential lead compounds for anticancer drug. In summary, our study will provide detailed anticancer mechanism of OC.

英文关键词： Heat shock protein;Natural compound;Autophagy;Anti-tumor