利用RNA引导的CRISPR/Cas9系统研究多房棘球绦虫丝氨酸蛋白酶抑制剂的功能

项目名称： 利用RNA引导的CRISPR/Cas9系统研究多房棘球绦虫丝氨酸蛋白酶抑制剂的功能

项目编号： No.31402191

项目类型： 青年科学基金项目

立项/批准年度： 2014

项目学科： 农业科学

项目作者： 闫鸿斌

作者单位： 中国农业科学院兰州兽医研究所

项目金额： 25万元

中文摘要： 棘球蚴病(俗称包虫病)是由棘球属绦虫的幼虫—棘球蚴引起的一类危害严重的人兽共患寄生虫病，是国际卫生组织优先防治的17种被忽略的热带疾病之一，目前尚无有效防治措施。本项目以多房棘球蚴干细胞和原头蚴为研究对象，以丝氨酸蛋白酶抑制剂（Em_serpins）为研究靶标，在充分利用多房棘球绦虫基因组研究成果的基础上，首次采用CRISPR/Cas9系统介导的基因组编辑技术对干细胞中的Em_serpins在基因组水平进行突变，并鉴定靶基因的突变效率及脱靶效应。分别采用qRT-PCR、免疫印迹、免疫组化及RTCA技术，探析F1代原头蚴中Em_serpins的表达水平、组织分布及虫体活动性等特点。通过动物感染实验确定F1代原头蚴感染性与繁殖力的变化。阐明Em_serpins在多房棘球绦虫发育和致病等过程中的功能，为新型疫苗和药物研制提供重要的靶分子，同时将CRISPR/Cas9系统拓展到绦虫功能基因研究中。

中文关键词： 多房棘球蚴；差异基因；表达谱芯片；发育；信号通路

英文摘要： Echinococcosis (commonly known as hydatid disease), caused by the metacestodes (proliferative larvae) of the genus Echinococcus tapeworms, is among the most severe parasitic diseases in humans and animals and is one of the 17 neglected tropical diseases (

英文关键词： Echinocuccus multilocularis；differentially expressed genes；Microarray；development；signal pathways