融合自组装双亲短肽提高Pseudomonas aeruginosa脂肪氧合酶热稳定性机制的研究

项目名称： 融合自组装双亲短肽提高Pseudomonas aeruginosa脂肪氧合酶热稳定性机制的研究

项目编号： No.31401638

项目类型： 青年科学基金项目

立项/批准年度： 2014

项目学科： 农业科学

项目作者： 刘松

作者单位： 江南大学

项目金额： 22万元

中文摘要： 脂肪氧合酶是一种重要的食品酶。申请人前期研究发现，源于酿酒酵母Zuotin蛋白的自组装双亲短肽(SAP)与Pseudomonas aeruginosa脂肪氧合酶（LOX）的N-端融合，得到了热稳定性显著提升的融合酶（SAP-LOX）,这是国内外首次报道融合SAP提高酶热稳定性的研究。申请人拟以该SAP-LOX为研究对象，从三方面对其热稳定化机制进行系统研究：(1) 通过SAP-LOX晶体结构解析和分子动力学模拟，确定SAP引入的分子内相互作用与酶稳定化的定量关系；(2) 通过研究SAP-LOX寡聚体的形成及影响因素，探明SAP介导的分子间相互作用与酶稳定化的定量关系；(3) 基于强化SAP-LOX分子间和分子内相互作用，设计高热稳定化效能的SAP，并验证其通用性。研究得到的相关结论将深入揭示短肽融合促进酶稳定化的机制，同时为分子改造提供新的范例和思路。

中文关键词： 自组装双亲短肽；蛋白质；稳定化；高效表达；机制

英文摘要： Lipoxygenase is an important food enzyme. In our previous study, self-assembling amphipathic peptide (SAP) from zuotin protein sequence was fused to the N-terminus of Pseudomonas aeruginosa lipoxygenase (LOX), yielding a fusion enzyme (SAP-LOX) with an en

英文关键词： Self-assembling amphipathic peptide；protein；stabilization；efficient expression；mechanism