项目名称: 旋毛虫抗肿瘤蛋白基因及其功能研究
项目编号: No.30972177
项目类型: 面上项目
立项/批准年度: 2010
项目学科: 生物科学
项目作者: 王学林
作者单位: 吉林大学
项目金额: 30万元
中文摘要: 旋毛虫包囊形成过程中寄生基因产生的寄生蛋白通过模拟宿主肌细胞凋亡调控下的细胞修复机制形成"nurse cell",这种调控机制同肿瘤细胞的凋亡信号调控机制极其相似。我们的研究证实旋毛虫虫体蛋白中存在调控肿瘤细胞凋亡的活性蛋白,且该蛋白通过线粒体和死亡受体凋亡途径参与调控人白血病细胞系K562、人肝癌细胞系H7402的凋亡。为获得该蛋白的全基因序列,本研究利用已建立的旋毛虫成虫和新生幼虫的T7噬菌体展示文库,采用Giordan的有机相多细胞淘选法筛选与K562、H7402特异结合的目的蛋白,利用旋毛虫cDNA文库为模板钓取其全长序列,通过构建原核表达载体表达目的蛋白,采用Ni-NTA His. Bind离子交换树脂纯化融合蛋白,复性后检测其诱导肿瘤细胞凋亡及抗肿瘤功能,为研发可恢复肿瘤细胞的凋亡程序,增加肿瘤细胞对化疗及放疗的敏感性,并具有自主知识产权的抗肿瘤药物奠定基础。
中文关键词: 旋毛虫;A200711基因;原核表达;展示文库;凋亡
英文摘要:
英文关键词: Trichinella spiralis;the A200711 gene;prokaryotic expression;phage display;apoptosis