苜蓿中华根瘤菌NtrY/NtrX双组份系统的作用机制研究

项目名称： 苜蓿中华根瘤菌NtrY/NtrX双组份系统的作用机制研究

项目编号： No.31370277

项目类型： 面上项目

立项/批准年度： 2013

项目学科： 生物科学

项目作者： 罗利

作者单位： 上海大学

项目金额： 82万元

中文摘要： 双组份系统是根瘤菌进行共生固氮作用的主要调节系统。NtrY/NtrX双组份系统最早发现于田菁根瘤菌,是结瘤、固氮所必需的。但其作用机制并不清楚。我们的研究发现，该系统还调节苜蓿中华根瘤菌胞外多糖合成、运动以及细胞分化，具有多功能性。其可能的分子机制有两种：1）NtrY组氨酸激酶同时磷酸化多种反应调节蛋白；2）NtrX反应调节蛋白同时激活多个下游靶标基因表达。为了检验这两种可能性，本项目拟应用磷酸化谱技术，结合细菌双杂交和免疫共沉淀，分离鉴定可以被NtrY直接磷酸化的蛋白质；应用转录组学与染色质免疫共沉淀技术，鉴定NtrX直接调节的下游靶标基因，并通过实时定量RT-PCR、启动子融合以及凝胶阻滞技术，验证获得的结果，从而揭示NtrY/NtrX双组份系统多功能性的分子机制。本项目对于阐明共生固氮作用的分子机制以及揭示细菌双组份系统信号传递保真性及可塑性具有重要的理论意义。

中文关键词： 双组份系统；苜蓿中华根瘤菌；NtrY/NtrX；共生固氮；基因表达调控

英文摘要： Several two-component regulatory systems from rhizobia are required for symbiotic nitrogen fixation on on host plants. The two-component system of NtrY/NtrX was firstly identified in Azorhizobium caulinodans, is essential for symbiotic nodulation and nitr

英文关键词： Two-component regulatory system；Sinorizobium meliloti；NtrY/NtrX；Symbiotic nitrogen fixation；Regulation of gene expression