EV71病毒与RD细胞膜受体蛋白相互作用研究

项目名称： EV71病毒与RD细胞膜受体蛋白相互作用研究

项目编号： No.30972630

项目类型： 面上项目

立项/批准年度： 2010

项目学科： 医药、卫生

项目作者： 朱冰

作者单位： 广州市妇女儿童医疗中心

项目金额： 32万元

中文摘要： 本课题利用功能蛋白质组学技术研究肠道病毒71型（EV71病毒）与人横纹肌肉瘤细胞（RD细胞）相互关系：1、将EV71病毒大量培养，纯化病毒制备亲和纯化柱，获取RD细胞膜受体，通过质谱分析技术、基因工程技术，建立细胞外膜受体候选蛋白库；2、将病毒进行双向电泳，结合上细胞膜受体蛋白酶标记物，分析两者的作用位点，利用基因工程技术构建EV71病毒外壳蛋白库；3、在上述基础上，通过免疫沉淀技术，确定EV71病毒与RD细胞受体作用蛋白，制备相关重要蛋白的单克隆抗体；4、通过细胞中和实验、抗体免疫竞争抑制试验确认并建立EV71病毒外衣壳蛋白库、RD细胞外膜受体蛋白库，及能阻断病毒侵染细胞的抗体库。通过本课题的实施将深入了解EV71病毒致细胞病变的机制，研究出细胞受体蛋白与EV71病毒相互作用的图谱，将有助于EV71病毒疫苗靶位蛋白的选择，有利于治疗性抗体的研究，并且有助于特异性临床诊断技术的建立。

中文关键词： EV71病毒；RD细胞膜蛋白；相互作用；免疫共沉淀；诊断

英文摘要：

英文关键词： EV71；RD cell membrane protein；interaction；co-immunoprecipitation；diagnosis