长链非编码RNA-VNN3和OBFC2A在苯血液毒性中的功能及机制研究

项目名称： 长链非编码RNA-VNN3和OBFC2A在苯血液毒性中的功能及机制研究

项目编号： No.81472957

项目类型： 面上项目

立项/批准年度： 2015

项目学科： 医药、卫生

项目作者： 高艾

作者单位： 首都医科大学

项目金额： 65万元

中文摘要： 苯中毒是我国重点防治的职业病，主要引起血液毒性。本课题组前期在慢性苯中毒患者中发现了与苯血液毒性密切相关的、新的长链非编码RNA(lncRNA)-VNN3和OBFC2A，但其功能和作用机制有待阐明。本研究拟通过体外实验和人群研究相结合，采用RNA pull-down、RIP-chip、ChIRP-seq方法，研究与VNN3和OBFC2A相互作用的蛋白和DNA；采用esiRNA干扰与FISH 定位相结合的c-KLAN技术抑制lncRNA功能后，研究上述lncRNA定位情况及其对苯毒性相关基因甲基化（PARP-1、PTEN、STAT3）及microRNA（miR-205、miR-133a）异常表达的调控作用及其机制，旨在从调控基因表达和表观遗传修饰两方面阐明lncRNA调控苯毒作用的机制；进一步在苯中毒、苯接触人群中验证血浆lncRNA的表达变化情况，为苯中毒危害筛查和早期诊断提供新靶标。

中文关键词： 苯中毒；血液毒性；长链非编码RNA；表观遗传学；生物标志物

英文摘要： Benzene poisoning, which mainly causes hematotoxicity, is the priority of the prevention and control of occupational diseases in china. Rencently, we screened out two key lncRNAs (VNN3&OBFC2A) associated with benzene poisoning through high-throughput lncRNA microarray. However, the function and mechanism of lncRNAs in benzene hematotoxicity remain poorly understood. Constructed overexpression vector and endoribonuclease-prepared siRNA（esiRNA）of these lncRNAs, combined knockdown and localization analysis of noncoding RNAs(c-KLAN), RNA-pull down, RNA-binding protein immunoprecipitation(RIP) and chromatin isolation by RNA purification-sequence (ChIRP-seq) will be applied to explore function of these lncRNAs in benzene hematotoxicity and its molecular mechanisms. Furthermore, these screened lncRNAs will be validated by using qRT-PCR in people exposed to benzene and benzene poisoning patients. LncRNA provides a rationale for the potential development of lncRNA-targeted approaches for the prevention and early diagnosis of benzene poisioning.

英文关键词： benzene poisoning;hematotoxicity;lncRNA;epigenetics;biomarker