大金发藓有效抗癌成分分析及诱导白血病细胞凋亡的机制研究

项目名称： 大金发藓有效抗癌成分分析及诱导白血病细胞凋亡的机制研究

项目编号： No.81202957

项目类型： 青年科学基金项目

立项/批准年度： 2013

项目学科： 医学八处

项目作者： 汤薇

作者单位： 陕西师范大学

项目金额： 24万元

中文摘要： 本项目以秦巴山区药用苔藓大金发藓为研究材料，选择不同白血病细胞系为细胞模型，通过离体实验进行大金发藓有效抗癌成分选择性诱导白血病细胞凋亡的信号转导通路和分子生物学机制研究，并建立L1210荷瘤小鼠实验动物模型开展在体抗癌研究。本研究通过高效液相色谱、质谱、核磁共振和红外光谱技术分离纯化大金发藓有效抗癌成分；应用免疫荧光、免疫印迹和RT-PCR技术分析细胞内凋亡相关蛋白和Caspase家族蛋白的表达活化，通过加入内、外源性凋亡通路特异性Caspase抑制剂，揭示大金发藓诱导白血病细胞凋亡的信号转导通路；利用小动物活体成像、电镜及分子生物学技术分析不同给药方式下荷瘤小鼠体内肿瘤生长抑制状况、体重和存活期变化、肿瘤组织超微结构变化和凋亡相关蛋白表达，求证大金发藓有效抗癌成分在离体实验和在体研究抗癌机制的一致性和差异。以期从细胞及在体水平阐明大金发藓有效抗癌成分诱导白血病细胞凋亡的分子生物学机制。

中文关键词： 大金发藓；白血病；ROS；Ca2+；细胞凋亡

英文摘要： Polytrichum commune L.ex Hedw. is a medicinal moss in Qin-ba mountain area. This project intends to research the apoptosis pathway, signaling control and molecular mechanism in leukemia cells which were induced to apoptosis by anti-cancer chemical component extracted from Polytrichum commune L.ex Hedw. in vitro, and discuss the anti-cancer effect on tumor-bearing mice. High performance liquid chromatography, mass spectrometry, nuclear magnetic resonance and infrared spectroscopy technology are used to extract and analyze the anti-cancer chemical component in Polytrichum commune L.ex Hedw. Immunofluorescence, Western blotting and RT-PCR detection are applied to detect the level altering of apoptosis related proteins and caspases. After adding intrinsic or extrinsic apoptosis pathway specific caspase inhibitors, apoptosis ratio is detected to reveal the signaling pathway involved in Polytrichum commune L.ex Hedw. induced leukemia cells apoptosis. Using in vivo imaging technology, electron microscopy and molecular biology technology, the tumor growth inhibition, altering of weight and survival time with different administration methods, ultrastructural changes of the tumor tissues and apoptosis related proteins expression are analyzed to identify the consistency and difference of the anti-cancer mechanism between

英文关键词： Polytrichum commune L.ex Hedw.；Leukemia；ROS；Ca2+；Apoptosis