dCK与Cdk1相互作用对辐射诱导的细胞周期G2/M期检查点激活的调控机制

项目名称： dCK与Cdk1相互作用对辐射诱导的细胞周期G2/M期检查点激活的调控机制

项目编号： No.31370837

项目类型： 面上项目

立项/批准年度： 2013

项目学科： 生物科学

项目作者： 马淑梅

作者单位： 吉林大学

项目金额： 80万元

中文摘要： 脱氧胞苷激酶（dCK）是磷酸化天然脱氧核糖核苷酸和外源性核苷类抗肿瘤药物的关键酶，在DNA合成及药物活化方面起重要作用。我们前期研究首次发现电离辐射导致ATM激活后，dCK Ser74位点发生磷酸化，进而参与G2/M期检查点的调控，质谱分析表明周期蛋白依赖性激酶1（Cdk1）是dCK结合蛋白。本课题运用免疫荧光共定位、GST-Pulldown和 Co-IP方法验证dCK与Cdk1相互作用；体外激酶活性分析验证dCK磷酸化Cdk1；通过截短体实验确定dCK与Cdk1结合位点；通过对结合位点进行突变，观察dCK与Cdk1结合功能的变化；通过 Co-IP和 Western blot确定dCK与其它Cdk1调控蛋白的关系。本研究将揭示dCK参与调控细胞周期G2/M检查点的新功能，对丰富肿瘤发生机制、指导肿瘤治疗具有重要意义。

中文关键词： 脱氧胞苷激酶；细胞周期；细胞死亡；细胞凋亡；细胞自噬

英文摘要： Deoxycytidine kinase(dCK) is a rate limiting enzyme critical for phosphorylation of endogenous deoxynucleosides for DNA synthesis and exogenous nucleoside analogues for anticancer and antiviral drug actions. Our preparatory work demonstrates that the atax

英文关键词： dCK；Cell Cycle；Cell Death；Apoptosis；Autophagy