结核分枝杆菌LrpA蛋白调控基因转录的机制研究

项目名称： 结核分枝杆菌LrpA蛋白调控基因转录的机制研究

项目编号： No.31400118

项目类型： 青年科学基金项目

立项/批准年度： 2014

项目学科： 生物科学

项目作者： 宋宁宁

作者单位： 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

项目金额： 24万元

中文摘要： 结核病是由结核分枝杆菌引起的一种重要的人畜共患传染病，严重危害人类健康。转录调控蛋白LrpA在结核分枝杆菌的持留中起到重要作用，但其转录调控机制尚不明确。本项目拟应用染色质免疫共沉淀结合高通量测序方法(ChIP-seq），鉴定该蛋白在基因组上新的调控子，以凝胶滞后试验（EMSA）进行体外验证，并通过化学足迹法验证LrpA与目的基因结合区域；在耻垢或卡介苗中过量表达该蛋白，通过qRT-PCR方法分析目的基因的表达水平差异，确定LrpA真正调控的基因；以滞后试验筛查LrpA新的辅助因子，明确新的小分子作为该蛋白的环境信号调控目的基因的表达水平；应用去嘌呤、去嘧啶和甲基干扰试验，定位受调控基因的启动子区域与LrpA互作中起到重要作用的碱基，进而绘制高分辨蓝图。本项目通过对LrpA在细菌持留中转录调控机理的研究，将为后期的药物开发提供强有力的理论依据。

中文关键词： 结核分枝杆菌；LrpA；转录调控；染色质免疫共沉淀(ChIP)；

英文摘要： Tuberculosis is an important zoonotic disease caused by Mycobacterium tuberculosis (Mtb), which has greatly threatened human health. The transcription regulator protein LrpA might play a role in Mtb persistence, but the mechanism of transcription regulati

英文关键词： Mycobacterium tuberculosis；LrpA；transcription regulation；Chromatin Immunoprecipitation (ChIP)；