协同进化假交替单胞菌芳香基硫酸酯酶热稳定性和琼脂硫酸酯水解活性的研究

项目名称： 协同进化假交替单胞菌芳香基硫酸酯酶热稳定性和琼脂硫酸酯水解活性的研究

项目编号： No.31401632

项目类型： 青年科学基金项目

立项/批准年度： 2014

项目学科： 农业科学

项目作者： 朱艳冰

作者单位： 集美大学

项目金额： 24万元

中文摘要： 琼脂是重要的食品添加剂。去除硫酸酯基团是琼脂生产的关键技术环节，研究用酶技术去除琼脂硫酸酯的理论基础具有重要意义。琼脂是热溶性高分子，天然硫酸酯酶热稳定性低或缺乏琼脂硫酸酯水解活性，限制了酶水解琼脂硫酸酯技术的应用。本项目综合运用定向进化和理性设计技术，对假交替单胞菌P. carrageenovora的芳香基硫酸酯酶进行分子改造，研究提高其热稳定性并协同进化其琼脂硫酸酯水解活性的理论。采用定向进化研究该酶热稳定性改造区域，借助饱和突变、同源建模及分子模拟等技术研究改造区域内微观结构变化与酶热稳定性和活性的关系，模拟并筛选热稳定性和琼脂硫酸酯水解活性协同进化的突变酶。通过本项目研究，将阐明协同进化该酶热稳定性和琼脂硫酸酯水解活性的结构机理，并有望获得在琼脂热溶状态下具有良好稳定性和琼脂硫酸酯水解活性的进化酶，为开发酶法去除琼脂硫酸酯的技术奠定酶学理论基础，同时也为食品酶分子改造提供理论依据。

中文关键词： 芳香基硫酸酯酶；热稳定性；琼脂硫酸酯水解活性；定向进化；分子设计

英文摘要： Agar is an important food additive. Removing the sulfate groups is a key technical process during the production of agar, which makes it great significant to study enzymatic hydrolysis of agar sulfate groups. Agar is a hot-melting polymer; and native sulf

英文关键词： arylsulfatase；thermostability；agar desulfation activity；directed evolution；molecular design