结核分枝杆菌压力反应因子SigC介导的分子致病机制研究

项目名称： 结核分枝杆菌压力反应因子SigC介导的分子致病机制研究

项目编号： No.30901276

项目类型： 青年科学基金项目

立项/批准年度： 2010

项目学科： 生物科学

项目作者： 范小勇

作者单位： 复旦大学

项目金额： 22万元

中文摘要： 研究显示，sigC仅存在于致病分枝杆菌中，基因敲除sigC 的结核分枝杆菌毒株在小鼠与豚鼠体内毒力明显丧失，提示SigC与结核杆菌致病性密切相关，然而其分子机制尚不明了。此前，我们基因组学研究发现无毒株H37Ra sigC基因上游启动子存在突变，并推测可能与其体内减毒相关。接着，我们应用定量RT-PCR和报告基因表达方式均直接证明了该启动子突变确实引起了H37Ra在细胞内生长过程中sigC基因表达下调，故我们拟在此基础上进行深入研究。拟利用M.smegmatis和H37Ra构建不同SigC表达强度的Knock-in菌株，并综合应用荧光定量RT-PCR、Microarray、免疫共沉淀、双向蛋白电泳及质谱等技术分析其在体外和巨噬细胞内受SigC调控的基因差异表达情况，旨在分析和鉴定与SigC相互作用的关键蛋白和受其调控的毒力基因或调控因子，从而在分子水平解析SigC介导的结核杆菌致病机制。

中文关键词： 结核分枝杆菌；SigC；致病机制；基因表达；蛋白相互作用

英文摘要：

英文关键词： Mycobacterium tuberculosis；SigC；Pathogenesis mechanism；Gene expression；Protein interaction