苏云金芽胞杆菌Cry1Ac蛋白构域Ⅲ定点突变及结构与功能研究

项目名称： 苏云金芽胞杆菌Cry1Ac蛋白构域Ⅲ定点突变及结构与功能研究

项目编号： No.31170092

项目类型： 面上项目

立项/批准年度： 2012

项目学科： 微生物学、植物学

项目作者： 吕媛

作者单位： 湖南师范大学

项目金额： 58万元

中文摘要： 苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白的定点突变对于获得毒力提高的突变株和阐明毒素的杀虫机理具有重要意义。本研究运用分子生物学理论和生物信息学技术，首次研究Cry1Ac5蛋白结构域Ⅲ中独特的β20-β21loop，我们将在丙氨酸扫描定点突变β20-β21loop结构中氨基酸的前期基础上，对所有突变子进行生物活性和突变前后结构的分析，发现关键位点，并将关键位点的氨基酸进一步突变为不同性质或不同结构的氨基酸，构建单突变子、删除突变子、双突变子和三突变子，通过对突变子的生物活性、结构特点和功能的推测分析，筛选关键突变子。将关键位点的关键突变子进行毒力变化机理分析（原毒素蛋白稳定性实验、寡聚体形成能力比较实验、结合能力比较实验等），明确β20-β21 loop的功能，为Cry1Ac的结构域Ⅲ在受体分子的识别和结合、维持蛋白的结构稳定性等方面提供新的生物学证据。

中文关键词： Cry1Ac5蛋白；苏云金芽胞杆菌；定点突变；杀虫活性；稳定性

英文摘要：

英文关键词： Cry1Ac5 protein；Bacillus thuringiensis；Site-directed mutagenesis；insecticidal activity；Stability