苹果双链RNA结合蛋白MdDRB调控miRNA合成和农艺性状的分子机理研究

项目名称： 苹果双链RNA结合蛋白MdDRB调控miRNA合成和农艺性状的分子机理研究

项目编号： No.31171946

项目类型： 面上项目

立项/批准年度： 2012

项目学科： 植物保护学、园艺学与植物营养学

项目作者： 由春香

作者单位： 山东农业大学

项目金额： 60万元

中文摘要： 双链RNA结合蛋白是miRNA生物合成必不可少的蛋白组分，本研究从苹果中克隆了双链RNA结合蛋白基因MdDRB，并获得了MdDRB转基因苹果愈伤组织和转基因苹果株系，在此基础上，计划利用MdDRB-GFP融合蛋白观察其亚细胞定位，通过电泳迁移率（EMSA）分析鉴定MdDRB蛋白与双链RNA的特异性结合，利用酵母双杂交、BiFC和PULL-DOWN证明MdDRB与核酸内切酶MdDCL1蛋白互作形成复合体。另外，利用转基因苹果材料，通过miRNA芯片的高通量分析和突变体的功能互补试验等鉴定MdDRB基因在miRNA合成中的生物学功能，最后通过分析转基因苹果的重要农艺性状、检测miRNA及其靶基因的表达水平、MdMIR172等重要miRNA基因的遗传转化等，阐明MdDRB蛋白调控苹果农艺性中的功能和分子机理，并获得具有特异农艺性状的转基因苹果资源。

中文关键词： 苹果；双链RNA结合蛋白；microRNA合成；转录后基因沉默；经济性状

英文摘要：

英文关键词： Apple；Double-strand RNA binding protein；microRNA biogenesis；Posttranstranscriptional gene silence；Economic trait