马铃薯腐烂茎线虫耐低温相关基因克隆与功能分析

项目名称： 马铃薯腐烂茎线虫耐低温相关基因克隆与功能分析

项目编号： No.31401721

项目类型： 青年科学基金项目

立项/批准年度： 2014

项目学科： 农业科学

项目作者： 马娟

作者单位： 河北省农林科学院植物保护研究所

项目金额： 24万元

中文摘要： 由马铃薯腐烂茎线虫危害造成的甘薯茎线虫病是我国北方薯区的重要病害，对低温的耐性是该线虫成功传播和侵染为害的关键因子。目前对该线虫抗寒机制尚不清楚。本研究以筛选得到的马铃薯腐烂茎线虫耐低温种群为材料，对不同低温胁迫条件下的马铃薯腐烂茎线虫进行转录组分析，筛选马铃薯腐烂茎线虫应答低温胁迫相关基因，并对部分基因进行克隆，确定其拷贝数，利用Real-time PCR及原位杂交技术分析在不同虫态中目的基因的表达特性，运用RNAi技术对相关基因功能进行分析，通过western-blot检测目的基因蛋白在不同处理线虫中表达量的差异，以原核表达技术验证目的基因蛋白活性，从而确定低温胁迫过程中相关基因在线虫抗寒性形成中的作用，获得一批对马铃薯腐烂茎线虫低温抗性具有调控作用的新基因，为了解马铃薯腐烂茎线虫应答低温胁迫的分子机制，在分子水平开展马铃薯腐烂茎线虫防治新策略研究奠定基础。

中文关键词： 甘薯茎线虫病；低温胁迫；差异基因；RNAi技术；Southern杂交

英文摘要： The potato rot nematode, Ditylenchus destructor Thorne could cause severe damage to sweet potato in north China. Tolerance to low temperature is one of the key factors for the successful invasion and infection of this nematode. The cold tolerance mechanis

英文关键词： potato rot nematode；tolerance；differentially expressed genes；RNA interference；Southern blotting