高糖对hESC向胰岛细胞分化过程中Igf2/H19差异甲基化区的调控及效应机制研究

项目名称： 高糖对hESC向胰岛细胞分化过程中Igf2/H19差异甲基化区的调控及效应机制研究

项目编号： No.31171444

项目类型： 面上项目

立项/批准年度： 2012

项目学科： 发育生物学与生殖生物学

项目作者： 黄荷凤

作者单位： 浙江大学

项目金额： 60万元

中文摘要： 妊娠期糖尿病（GDM）宫内高糖环境已证实在排除遗传因素后增加子代患糖尿病风险，但发病机制不清。本实验室前期研究发现GDM小鼠子代胰腺细胞特异性损伤、亲源性印记基因Igf2修饰异常且存在隔代遗传。本项目将直接研究高糖对人胚胎干细胞（hESC）向胰岛细胞分化中Igf2/H19差异甲基化区（DMR）的调控及效应机制：采用hESC诱导分化和胰岛细胞特异标志性基因及功能评价技术，观察高糖对hESC向胰岛细胞分化成熟过程的直接影响；定量PCR检测胰岛细胞发育及糖尿病发病密切相关基因Igf2和甲基转移酶（Dnmt）的改变；亚硫酸盐修饰后测序，检测Igf2/H19-DMR甲基化模式；单核苷酸多态性分析，确定印记紊乱相关编码基因突变类型；Dnmt转染及siRNA技术，验证甲基化修饰改变对hESC向胰岛细胞分化中Igf2/H19 DMR正负效应机制及胰岛细胞功能影响。为宫内高糖致胎源性糖尿病发病提供理论依据。

中文关键词： 宫内环境；胰岛；生殖细胞；表观遗传；甲基化

英文摘要：

英文关键词： intrauterine environment；pancreatic islet；germ cells；epigenetics；methylation