聚电解质多层膜基片电泳流动型ELISA系统的研究

项目名称： 聚电解质多层膜基片电泳流动型ELISA系统的研究

项目编号： No.21304006

项目类型： 青年科学基金项目

立项/批准年度： 2014

项目学科： 数理科学和化学

项目作者： 申鹤云

作者单位： 北京化工大学

项目金额： 25万元

中文摘要： 利用多功能的聚电解质多层膜（polyelectrolyte multilayers: PEMs）修饰基片，通过电泳技术作为运输检测液体的驱动力，创制灵敏、快速、简便的流动型酶联免疫吸附试验（ELISA）系统。解决常规ELISA系统中检测分子（抗原）及非抗原分子的非特异性吸附导致的低灵敏度问题、及其抗原分子的自由扩散反应的低检测效率问题。利用层层自组装的方法，将PEMs修饰于多孔膜表面及内部，研究其表面的第一抗体的物理吸附或化学结合能力及抑制蛋白质的非特异性吸附程度。电泳电场使不同种类蛋白质分子依次透过多孔膜基片，在时间与空间上分离抗原，并且在短时间的流动过程中使抗原局部浓缩到多孔膜（即第一抗体）近旁，在其他蛋白质的少干扰环境中完成灵敏、快速的抗原-抗体反应。研究C反应蛋白与小分子蛋白β2-微球蛋白在血清溶液中的定量检测，并且研究分离与检测同步法进行β2-微球蛋白的定量检测。

中文关键词： 电泳；ELISA；聚电解质多层膜；；

英文摘要： In this study, we develop a novel electrophoresis flow enzyme linked-immunosorbent assay (ELISA) system based on functional polyelectrolyte multilayers (PEMs). This ELISA system could improve the detection sensitivity of the conventional ELISA due to lower nonspecific adsorption and overcome the diffusion-limited reaction. The PEMs could be modified on/in to a porous membrane by layer-by-layer process. The physical or chemical adsorption of primary antibody on the PEMs and the suppression ability of nonspecific adsorption of PEMs would be studied. The different kind of proteins could successively permeate through the PEMs modified membrane drived by the electric field of electrophoresis. Hence, the electrophoresis flow ELISA system could separate various proteins on 'time and space' and locally concentrate the antigen around with primary antibody, leading to sensitive and rapid detection. We try to detect disease index protein, C-reaction protein (CRP) and β2-microglobulin, in serum sample. Moreover, we develop a 'separation-detection' synchronizing method to detect small size protein of β2-microglobulin.

英文关键词： electrophoresis；ELISA；polyelectrolyte multilayers；；