藻毒素降解关键酶的高通量筛选及降解机理研究

项目名称： 藻毒素降解关键酶的高通量筛选及降解机理研究

项目编号： No.20907010

项目类型： 青年科学基金项目

立项/批准年度： 2010

项目学科： 生物科学

项目作者： 刘思秀

作者单位： 复旦大学

项目金额： 20万元

中文摘要： 频繁发生的蓝藻水华向环境中释放的藻毒素(MCs)是一种强烈的肝毒素和肿瘤促进剂，微生物降解在MCs的归趋中起重要作用。但不同菌种的降解的机理尚未阐明，高效降解关键酶基因信息资源缺乏。本项目以多株分离纯化出的新的MCs降解纯菌种为研究对象，应用高通量芯片筛选技术结合基因组文库等分子生物学技术，在以硅酮为载体的芯片上，通过驱动已构建的MCs降解菌基因表达文库各片段细胞溶液和MCs在微米孔径的微管中流动，保持蛋白活性，实现两者反应，反应器出口连接光纤分光光度计和MS检测仪，对MCs浓度及反应各级中间产物进行跟踪检测，分析、筛选涉及MCs降解过程的所有关键酶类，并对降解中间产物及降解机理进行深入研究。该生物芯片能够应用于研究多种微生物菌种降解不同藻类毒素的机理和对多种降解关键酶类进行高通量筛选，效率高、费用低、污染少、易重复，解决了生物芯片蛋白固定失活问题，避免了复杂的常规实验重复和浪费。

中文关键词： 藻毒素(MCs)；微流控芯片；基因组文库；藻毒素降解关键酶；

英文摘要：

英文关键词： Microcystins；microfluidcs；genomic library；degradation key enzymes；