毕赤酵母转录因子Fhl1p功能鉴定及其促进外源蛋白表达的机理

项目名称： 毕赤酵母转录因子Fhl1p功能鉴定及其促进外源蛋白表达的机理

项目编号： No.31400062

项目类型： 青年科学基金项目

立项/批准年度： 2014

项目学科： 生物科学

项目作者： 梁书利

作者单位： 华南理工大学

项目金额： 26万元

中文摘要： 毕赤酵母是高效分泌表达外源蛋白的细胞工厂，目的基因转录、翻译后修饰、转运及分泌过程对外源蛋白表达的影响已有深入的研究。然而鲜有文献分析毕赤酵母翻译过程与外源蛋白表达的关系。核糖体是蛋白质的合成场所，目的基因mRNA在核糖体上的翻译效率显著影响其最终产量。前期研究发现目的基因mRNA的丰度增加到一定程度会产生翻译压力而限制产量的提高。过表达核糖体蛋白基因的转录因子Fhl1p可促进植酸酶的表达，然而其机理不明确。本课题拟通过RNAi技术、功能异源回补及CHIP-Seq技术对Fhl1p进行功能鉴定并分析其结合位点；采用RNA-Seq技术分析Fhl1p对rRNA合成及核糖体蛋白基因转录的激活作用；结合核糖体图谱技术在翻译水平对毕赤酵母蛋白合成速率进行定量，分析Fhl1p对核糖体生物合成及蛋白翻译过程的调控，探讨其促进外源蛋白表达的机理；为毕赤酵母核糖体生物合成及蛋白翻译效率的理性调控提供理论依据。

中文关键词： 毕赤酵母；转录因子；核糖体图谱；翻译调控；

英文摘要： Pichia pastoris has been widely used as the cellular factory for the efficient expression of heterogeneous proteins. The effects of the transcription, post-translational modification, transportation and secretion on the expression of heterogeneous protein

英文关键词： Pichia pastoris；Transcription factor；Ribosome profile；Translational regulation；