利用聚焦离子束技术制备低温电镜冷冻含水切片方法的研究

项目名称： 利用聚焦离子束技术制备低温电镜冷冻含水切片方法的研究

项目编号： No.31400734

项目类型： 青年科学基金项目

立项/批准年度： 2014

项目学科： 生物科学

项目作者： 张建国

作者单位： 中国科学院生物物理研究所

项目金额： 23万元

中文摘要： 低温电子断层成像三维重构（cryo-ET）技术是发展结构生物学和细胞生物学研究的重要技术。该技术可以得到更真实和接近天然的细胞内部高分辨率三维结构以及蛋白质大分子定位及相互作用的信息，是蛋白质组学研究的重要的辅助手段。现有的样品制备方法--冷冻切片技术，存在诸多问题,如：样品的压缩、振颤、皱缩、断裂以及载网附着能力差等，严重影响了该研究领域的发展。 本项目用聚焦离子束（FIB）减薄技术，制备细胞冷冻含水超薄切片。研究内容：（1）适用于不同电镜和低温冷冻杆样品夹具和传输装置的研制；（2）以单细胞生物作为测试样品，优化聚焦离子束制备超薄冷冻切片的参数，研究作用机理；（3）对制备出的样品进行电子断层扫描三维重构，并对该技术进行评价。该项目的完成可以促进cryo-ET技术在结构生物学和细胞生物学的应用，进而推动学科的发展。

中文关键词： 电子断层成像；聚焦离子束；冷冻含水切片；细胞；

英文摘要： Cryo-electron tomography is an important research method in the structural biology and cell biology. There are a few cellular specimens can be examined directly by cryo-TEM. However, the majority of the eukaryotic cell volume is impossible, and thus requi

英文关键词： cryo-tomography；focused ion beam；frozen-hydrated sections；cell；