miRNAs在断奶仔猪抗F18大肠杆菌感染中的作用机制分析

项目名称： miRNAs在断奶仔猪抗F18大肠杆菌感染中的作用机制分析

项目编号： No.31140027

项目类型： 专项基金项目

立项/批准年度： 2012

项目学科： 轻工业、手工业

项目作者： 包文斌

作者单位： 扬州大学

项目金额： 10万元

中文摘要： 本研究在前期运用高通量测序筛选F18大肠杆菌抗性型和敏感型断奶仔猪小肠上皮细胞差异miRNAs的基础上，采用poly(A)-tailed PCR和RT-PCR 对筛选的6个目标miRNAs进行验证，结合课题组前期表达谱芯片和蛋白质组学分析结果，分析起核心调控作用的miRNAs及其靶基因，继而利用荧光素酶报告基因系统对靶基因进一步进行验证，得到与断奶仔猪F18大肠杆菌抗性调控最相关的关键靶基因。建立稳定转染的关键靶基因过表达和RNAi阳性的IPEC-J2小肠上皮细胞系，通过小肠上皮细胞黏附和黏附抑制实验，研究关键靶基因对断奶仔猪小肠上皮细胞F18大肠杆菌黏附状态的影响，精确分析关键靶基因的功能。本研究从miRNAs 层面上，与前期mRNA和蛋白质水平的研究结果有机结合，可进一步加深对断奶仔猪F18大肠杆菌抗性调控机制的认识，为中国地方猪品种大肠杆菌病抗性研究和育种实践奠定坚实基础。

中文关键词： 断奶仔猪；高通量测序；F18大肠杆菌；小RNA；靶基因

英文摘要：

英文关键词： weaned piglets；high-throughput sequencing；E. coli F18；microRNA；target gene