适用于鲤的“自杀性”DNA疫苗载体清除机制、清除效果及免疫研究

项目名称： 适用于鲤的“自杀性”DNA疫苗载体清除机制、清除效果及免疫研究

项目编号： No.31402347

项目类型： 青年科学基金项目

立项/批准年度： 2014

项目学科： 农业科学

项目作者： 刘振兴

作者单位： 广东省农业科学院动物卫生研究所

项目金额： 23万元

中文摘要： 用于构建DNA疫苗的常规真核表达载体在机体内可长期存在并持续表达外源基因，增加了宿主免疫及生物安全风险。而以甲病毒复制子为基础的“自杀性”DNA疫苗载体可以自我清除，但其载体容量小，且清除进程无法控制。针对上述问题，本研究将“鲤的金属硫蛋白酶基因启动子和重构型Caspase-8”组成的凋亡元件插入pEGFP-N1载体，构建了一种适用于鲤的“自杀性”DNA疫苗载体。在此基础上，本项目拟开展以下研究：（1）通过Annexin V、Tunnel、JC-1染色等方法检测载体的体外凋亡诱导情况，阐明载体的清除机制；（2）通过TaqMan PCR、动物活体成像等技术，评价载体在鲤体内的诱导清除效果；（3）将鲤科疱疹病毒3型的囊膜蛋白编码基因ORF59插入“自杀性”载体，通过ELISA检测特异性抗体水平，评价载体诱导的免疫效果。通过本项目实施可以为“自杀性”载体应用于鲤的DNA疫苗研究提供理论依据。

中文关键词： 自杀性；DNA疫苗；凋亡；鲤疱疹病毒3型；

英文摘要： Conventional eukaryotic expression vector used to construct DNA vaccine caused a common problem: the persistence of DNA vaccine vector in the host after vaccination caused dangerous of autoimmune, immune tolerance and potential integration of DNA vaccine

英文关键词： suicidal；DNA vaccine；apoptosis；CyHV-3；