GCRV 感染动态示踪及进入细胞途径研究

项目名称： GCRV 感染动态示踪及进入细胞途径研究

项目编号： No.31372565

项目类型： 面上项目

立项/批准年度： 2013

项目学科： 农业科学

项目作者： 方勤

作者单位： 中国科学院武汉病毒研究所

项目金额： 85万元

中文摘要： 为探讨草鱼呼肠孤病毒（GCRV）在侵染过程中进入细胞的分子机制，本项目拟依据纳米材料量子点独特的荧光性质及超强的光稳定性等特点，采用量子点对GCRV进行体外分子标记，构建量子点标记的GCRV颗粒（GCRV-QDs）。应用实时定量PCR等方法，比较GCRV-QDs与GCRV颗粒的感染特性，继而进行GCRV-QDs感染细胞实时动态示踪，获得GCRV-QDs感染细胞的动态行为影像。利用已制备的VP5、VP7抗体，检测病毒侵染细胞过程中VP5和VP7蛋白复合物的解聚与构象变异。此外，通过细胞因子药物抑制实验，结合荧光标记网格蛋白及其它膜转运蛋白、siRNA干扰等分子生物学技术，研究GCRV-DQs入侵细胞的精细行为，探明病毒入侵细胞的动态行为方式。该研究对于揭示GCRV及dsRNA病毒感染的分子机制具有十分重要的理论与实践意义。

中文关键词： 无囊膜病毒；草鱼呼肠孤病毒；量子点；动态示踪；内吞途径

英文摘要： To understand how grass carp reovirus（GCRV）enter into host cells during infection,a dynamic tracing of the infectious viral particle entering into living cell and its molecular pathogenesis will be investigated. In this proposed study，quantum dots (QDs),

英文关键词： Non-enveloped viruses；Grass carp reovirus；Quantum dots；Viral dynamic tracing；Endocytic pathway