活细胞中蛋白质寡聚化动态过程实时荧光成像与定量分析技术研究

项目名称： 活细胞中蛋白质寡聚化动态过程实时荧光成像与定量分析技术研究

项目编号： No.61178078

项目类型： 面上项目

立项/批准年度： 2012

项目学科： 信息四处

项目作者： 陈同生

作者单位： 华南师范大学

项目金额： 78万元

中文摘要： 活细胞中蛋白质分子动态行为的实时无损检测与分析是生命科学研究的迫切需要。本项目以细胞凋亡过程中Bax蛋白寡聚化为生物模型，发展一种新型的基于荧光共振能量转移(FRET)的活细胞中蛋白质寡聚化动态过程的实时荧光成像与定量分析技术。首先，构建类似各种Bax寡聚体的FRET基因质粒并提取纯化相应的基因蛋白；其次，进行FRET基因蛋白体系下的实验和理论研究，探索FRET效率随着各种寡聚体组份变化的规律，进而建立活细胞中蛋白质寡聚化动态过程的FRET实时成像和定量分析方法(Oli-FRET)；然后，运用Oli-FRET技术在单个活细胞中实时研究Bax寡聚化动态过程及其调控线粒体途径凋亡的准确分子机理。本项目不仅为蛋白质寡聚化这一重要生物学问题的研究提供关键的技术手段，而且将发展一种新型的可广泛用于活细胞中生物大分子动态行为研究的荧光实时检测与定量分析技术，对分子细胞生物学的研究和发展具有重要意义。

中文关键词： 荧光共振能量转移(FRET)；定量FRET检测；活细胞；细胞凋亡；FRET探针

英文摘要：

英文关键词： Fluorescence resonance energy transfer (FRET)；Quantitative FRET measurement；living cells；Apoptosis；FRET probe