番茄黄化曲叶病毒抑制转录水平基因沉默和DNA甲基化研究

项目名称： 番茄黄化曲叶病毒抑制转录水平基因沉默和DNA甲基化研究

项目编号： No.31371914

项目类型： 面上项目

立项/批准年度： 2013

项目学科： 农业科学

项目作者： 谢艳

作者单位： 浙江大学

项目金额： 80万元

中文摘要： 本项目拟以我国发生面最广、危害最重的单组份双生病毒番茄黄化曲叶病毒（TYLCV）为材料，在明确TYLCV具有回复转录水平基因沉默（TGS）的基础上，构建PVX重组表达载体并浸润16-TGS植株以鉴定TYLCV编码的TGS基因沉默抑制子（VSR）。构建VSR突变的病毒突变体的侵染性克隆，分析病毒突变体的生物学性状及其病毒基因组DNA甲基化水平的变化。将VSR遗传转化拟南芥，分析抑制子的表达对拟南芥已发生TGS沉默的内源基因甲基化的影响、从头甲基化（de novo methylation）的影响以及HEN1甲基转移酶活性的影响。利用酵母双杂交、BiFC、Co-IP筛选甲基化途径中与TYLCV基因沉默抑制子互作的寄主因子。研究结果将有助于我们了解单组份双生病毒抑制TGS和寄主DNA甲基化的作用机理，进而阐明病毒致病及逃逸寄主植物防御的分子机制，为TYLCV病毒病的防治提供新的策略和思路。

中文关键词： 转录水平基因沉默；DNA甲基化；寄主互作；番茄黄化曲叶病毒；V2蛋白

英文摘要： Tomato yellow leaf curl virus (TYLCV) is a monopartite begomovirus and has caused devastating damage in China. Our preliminary results showed TYLCV could reverse transcriptional gene silencing (TGS) on transgenic 16-TGS plant. In this project, we will use

英文关键词： transcriptional gene silencing；DNA methylation；host interaction；Tomato yellow leaf curl virus；V2