荧光定量PCR技术在监测目标赤潮藻及孢囊中的应用

项目名称： 荧光定量PCR技术在监测目标赤潮藻及孢囊中的应用

项目编号： No.41176141

项目类型： 面上项目

立项/批准年度： 2012

项目学科： 海洋科学

项目作者： 陆斗定

作者单位： 国家海洋局第二海洋研究所

项目金额： 66万元

中文摘要： 正确鉴定和快速定量检测赤潮原因种及孢囊是进行赤潮研究和预警的前提和基础，而赤潮藻形态鉴定经验依赖性强，特别是对于具毒卡尔藻等个体微小且较细胞壁的种类和孢囊更显示出了其局限性。荧光定量PCR（FQ-PCR）是一种新的核酸定量检测技术，其具有快速、特异、灵敏、自动化程度高和高通量的特点。本研究拟建立重要目标赤潮藻种类及孢囊的荧光实时定量PCR检测技术：通过PCR扩增克隆测序获取赤潮藻的基因序列，筛选靶基因，再经比对分析设计FQ-PCR引物和Taq Man探针；建立和优化赤潮藻和孢囊DNA提取方法，应用FQ-PCR引物和Taq Man探针进行扩增，并验证扩增的特异性和重复性，建立FQ-PCR的实验室检测技术；通过实验室模拟自然样品，进一步优化DNA制备和扩增条件，并最终将其用于自然样品单种和多种目标赤潮藻的高通量定量分析。项目的完成对目标赤潮藻的监测、预警具有重要科学意义与应用前景。

中文关键词： 赤潮；目标赤潮藻；荧光定量；检测；监测

英文摘要：

英文关键词： harmful algal blooms；causative species；FQ-PCR；detection；monitoring