家蝇抗病毒蛋白的分离纯化、基因克隆表达及功能分析研究

项目名称： 家蝇抗病毒蛋白的分离纯化、基因克隆表达及功能分析研究

项目编号： No.31172162

项目类型： 面上项目

立项/批准年度： 2012

项目学科： 生物科学

项目作者： 艾辉

作者单位： 华中师范大学

项目金额： 61万元

中文摘要： 昆虫通过体液和细胞免疫对入侵病原微生物如细菌、病毒等作出有效免疫防御反应，对细菌的免疫目前已有比较深入的了解，但其对病毒的防御和控制的研究报道较少。前期试验中，申请者从家蝇中纯化出一种对BmNPV和AcMNPV两种昆虫病毒具有显著抗性的单一蛋白组分HAP。在此基础上，本项目拟对前期研究中的抗病毒蛋白粗样进一步分离纯化，以期获得更多种抗病毒蛋白因子；采用分子技术克隆家蝇抗病毒基因cDNA全长序列，并通过体外重组、转化、转染技术在家蚕Bac-to-Bac高效基因表达系统中大量表达，Ni-NTA柱亲和层析后验证其活性功能；采用荧光定量PCR技术探明抗病毒基因在家蝇发育中的时空表达模式，并利用光谱分析技术对蛋白分子构象进行初步解析。研究结果有助于深入揭示包括家蝇在内的昆虫抗病毒免疫生理生化机制，进一步丰富和完善昆虫免疫防御体系理论，也为后续培育新型高抗病家蚕种质资源和潜在的医药应用提供基础性资料。

中文关键词： 家蝇；抗病毒；转录组测序；原核表达；亲和层析

英文摘要：

英文关键词： Housefly；Antiviral；Transcripome sequencing；Prokaryotic expression；Affinity chromatography