假单胞杆菌中对硝基酚代谢途径及降解操纵子的表达调控机理研究

项目名称： 假单胞杆菌中对硝基酚代谢途径及降解操纵子的表达调控机理研究

项目编号： No.31170036

项目类型： 面上项目

立项/批准年度： 2012

项目学科： 微生物学、植物学

项目作者： 伍宁丰

作者单位： 中国农业科学院生物技术研究所

项目金额： 58万元

中文摘要： 对硝基酚（PNP）是一类难降解的硝基芳香烃类环境污染物，利用微生物对污染环境进行生物修复逐渐受到人们重视，因此对其代谢途径和代谢中关键基因的表达调控研究也成为热点。本实验室分离到一株能同时降解甲基对硫磷（MP）和PNP的假单胞菌1-7，构建了其Fosmid基因组文库，筛选到一个含有PNP降解操纵子的12kb片段，并通过实验验证了其中7个编码基因（pdcABCDEFG）的生物学功能。本研究拟利用基因敲除技术突变目的基因，分析原始菌株和突变菌株PNP代谢能力及代谢产物，验证关键蛋白在PNP代谢过程中的功能，从而确定PNP在假单胞菌1-7中的代谢途径。并分析和确定调控蛋白，研究操纵子中启动子的结构特征，进一步在体内和体外验证操纵子中启动子及调控蛋白的相互作用，确定调控蛋白的具体识别序列，进而阐明PNP降解操纵子的表达调控机理。为硝基芳香烃化合物引起的环境问题的生物修复提供理论依据。

中文关键词： 对硝基酚；生物降解；基因簇；假单胞菌；转录调控

英文摘要：

英文关键词： para-Nitrophenol(PNP)；Biodegradation；Gene cluster；Pseudomonas；Transcriptional regulator