多基因协同调控里氏木霉高效分泌表达蛋白的研究

项目名称： 多基因协同调控里氏木霉高效分泌表达蛋白的研究

项目编号： No.31400067

项目类型： 青年科学基金项目

立项/批准年度： 2014

项目学科： 生物科学

项目作者： 苏小运

作者单位： 中国农业科学院饲料研究所

项目金额： 24万元

中文摘要： 里氏木霉诱变菌纤维素酶高产性状来自于多个基因的共同作用，但基因间是否存在协同调控及作用机理并不清楚。辨识出能协同调控高效分泌内、外源蛋白的重要基因组合及表达方式可大大加快里氏木霉的基因工程育种。高产菌CL847中四个关键转录因子(cre1、ace1、ace2和xyr1)的表达发生了有规律的变化。据此选定这四个关键因子作为模型对基因间能否协同调控内源纤维素酶的高效分泌表达进行研究。对每个基因，构建突变启动子文库（插入能增强转录的gpd box）或RNAi质粒分别多水平上调或下调基因的表达。将不同数目或组合的突变启动子文库和/或RNAi质粒同时转化木霉，在转化子中引入这四个基因表达水平组合的丰富生物多样性，筛选纤维素酶分泌极大提高的转化子，从而揭示所研究的调控基因间是否存在协同作用及它们的作用方式。对外源基因的表达选定黑曲霉脂肪酶为模型、关键因子hac1、ftt1和ftt2为靶点同法进行研究。

中文关键词： 里氏木霉；协同调控；纤维素酶；外源基因；转录因子

英文摘要： The hyperproducing ability of mutated Trichoderma reesei strains are from the actions of multiple genes. However, whether there is synergistic regulation and how it works among multiple genes are not clear. Thus the identification of the combinations of i

英文关键词： Trichoderma reesei；synergistic regulation；cellulase；heterologous gene；transcriptional factor