开发适用于链霉菌的新型诱导表达系统

项目名称： 开发适用于链霉菌的新型诱导表达系统

项目编号： No.31400034

项目类型： 青年科学基金项目

立项/批准年度： 2014

项目学科： 生物科学

项目作者： 王为善

作者单位： 中国科学院微生物研究所

项目金额： 26万元

中文摘要： 链霉菌能够产生丰富的抗生素，是重要的工业微生物，但是，目前该菌尚没有严谨、高效的诱导表达系统，这严重制约了对其进行代谢工程与合成生物学的研究。因此，本申请项目旨在开发适用于链霉菌的新型诱导表达系统。前期，申请人根据链霉菌诱导表达系统对调控元件的具体要求，在链霉菌中筛找到能够响应土霉素等廉价小分子的MarR家族调控蛋白OtrR和CtcS及其靶启动子。所以，本研究拟首先深入解析OtrR和CtcS的调控机理，确定它们的DNA结合序列及其最佳诱导物；然后建立体内定量方法，分析这些元件在体内实现开启与关闭的相关参数及其动态过程；最后依据体内相关参数，理性组装适用于链霉菌的诱导表达系统，并利用该系统对天蓝色链霉菌放线紫红素（Act）生物合成及其前体供应途径进行“适时”、“适量”的控制，以实现Act产量的提高。本申请项目开发的诱导表达系统将为链霉菌相关研究提供方便有效的表达控制工具。

中文关键词： 诱导表达系统；链霉菌；启动子工程；适配；自调控

英文摘要： Streptomycetes are an important antibiotic producing bacteria. However, effective and convenient inducible gene expression systems that can be used for regulating the gene expression strength are currently not available in this genus. Here, novel inducib

英文关键词： Inducible gene expression system；Streptomyces；promoter engineering；Fine-tuning；Autoregulation