高尔基体相关蛋白GP73增强脯氨酸羟化酶PHD3泛素化降解稳定HIF-1α促肝癌生长转移机制和干预研究

项目名称： 高尔基体相关蛋白GP73增强脯氨酸羟化酶PHD3泛素化降解稳定HIF-1α促肝癌生长转移机制和干预研究

项目编号： No.81372654

项目类型： 面上项目

立项/批准年度： 2013

项目学科： 医药、卫生

项目作者： 张巨波

作者单位： 复旦大学

项目金额： 70万元

中文摘要： 高尔基体的改变参与了肿瘤的发生发展,其相关蛋白GP73是肝癌诊断和预后重要标志物，但生物学功能尚不明确。前期研究显示GP73高表达肝癌患者切除术后复发高预后差。恶性度高肝癌细胞中GP73高表达，慢病毒介导敲低其表达可抑制细胞增殖、运动、侵袭，回补对shRNA有抗性GP73 cDNA能恢复其恶性表型。质谱结果和内、外源性Co-IP均提示羟基化HIF-1α促进其泛素化降解的关键酶PHD3是与GP73相互作用的蛋白。常氧、缺氧条件下敲低和过表达GP73可下调、上调HIF-1α表达。进一步将构建GP73信号肽突变、不定位高尔基膜突变及GP73、PHD3双过表达细胞，通过缺氧、动态激光共聚焦、染色质免疫沉淀等方法研究GP73外分泌和膜定位对PHD3空间分布的调节并促进其泛素化降解,及HIF-1α对GP73转录激活作用(正反馈)，明确GP73促肿瘤血管生成作用及对Sorafenib治疗疗效的预测。

中文关键词： 肝细胞肝癌；高尔基体相关蛋白；缺氧诱导因子；活性氧；转移/耐药

英文摘要： Central to the secretary pathway, the Golgi apparatus modifies and systematizes cell products and transfers them to their final destinations within the cell. It is assumption that the balance of protein trafficking between different subcellular compartmen

英文关键词： hepatocellular carcinoma；GOLM1；HIF1α ；reactive oxy gen species；metastasis/drug resistance