噬菌体随机肽库筛选鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白亲和肽研究

项目名称： 噬菌体随机肽库筛选鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白亲和肽研究

项目编号： No.31172295

项目类型： 面上项目

立项/批准年度： 2012

项目学科： 畜牧学与草地科学、兽医学、水产学

项目作者： 李广兴

作者单位： 东北农业大学

项目金额： 65万元

中文摘要： 鸡传染性支气管炎（IB）是由鸡传染性支气管炎病毒（IBV）引起的一种急性、高度接触性呼吸道传染病，严重危害世界养禽业健康发展。IBV表面纤突S蛋白氨基端的S1蛋白与宿主细胞受体相互作用介导病毒囊膜与细胞膜融合及随后的感染。本研究采用原核表达系统在大肠杆菌中高效表达IBV S1蛋白；以纯化的S1蛋白为靶蛋白，利用噬菌体12肽随机多肽库与其结合后进行生物淘洗，筛选出含S1蛋白特异性结合多肽的噬菌体；通过序列测定确定亲和肽序列并与参照序列进行比较，推导出IBV潜在的受体或受体结合区；化学合成亲和肽后进行IBV与受体结合的阻断试验；利用病毒蚀斑实验、real-time PCR 和SPF雏鸡动物实验分析多肽在体内外抗IBV感染功效与机制。利用荧光素及生物素标记的肽介导的免疫组化技术结合激光共聚焦荧光观察和免疫酶反应精确定位IBV在感染动物靶器官中的动态分布。通过本研究进一步阐明IBV的致病机理。

中文关键词： 鸡传染性支气管炎病毒；IBV S1蛋白；受体；噬菌体展示技术；

英文摘要：

英文关键词： Avian infectious bronchitis virus；IBV S1 protein；Receptor；Phage display technique；