基于结构分析的嗜热CBM拆分-易位-组合融合对木聚糖酶稳定性-活性影响

项目名称： 基于结构分析的嗜热CBM拆分-易位-组合融合对木聚糖酶稳定性-活性影响

项目编号： No.31371831

项目类型： 面上项目

立项/批准年度： 2013

项目学科： 农业科学

项目作者： 刘亮伟

作者单位： 河南农业大学

项目金额： 83万元

中文摘要： 木聚糖酶能降解非淀粉多糖从而成为重要的焙烤用酶制剂，但高温和不溶性底物严重影响其广泛应用。嗜热碳水化合物结合结构域(CBM)与酶活性-稳定性有关，但是CBM结构较大、且研究局限于GH10家族木聚糖酶C端去除/融合。基于结构域分析，项目组拟以黑曲霉Xyn为GH11家族木聚糖酶模式分子，将嗜热海栖热袍菌CBM拆分为C1/C2两个结构融合Xyn，解析C1/C2对酶稳定性、活性影响有何不同；而后将CBM/C1/C2结构域易位至N端，与C端比较对酶性质影响有何不同；进而以四种方式将C1/C2组合融合在酶两端，探讨组合融合对稳定性、活性的叠加效应。通过CBM拆分、易位、组合融合，探讨嗜热CBM所含较小结构的不同功能对其稳定性影响、深入解析嗜热结构域稳定性作用、探讨结构域易位、双端融合对多结构域酶分子进化作用；获得稳定性、不溶性底物降解活性增强的融合酶，更有效提高焙烤品质量，有理论和实际应用双重意义。

中文关键词： 碳水化合物结合结构域；融合；稳定性；活性；

英文摘要： Because of degrading xylan,the main non-starch polysaccride in creal, xylanase has become an important enzyme product in bakery industry, but high temperature and insoluble substrate limit xylanase usage.Thermophilic carbohydrate binding module (CBM) rela

英文关键词： CBM；fusion；themostability；activity；