细胞膜和线粒体Cx43介导氧化应激与心脏缺血后处理相关性研究

项目名称： 细胞膜和线粒体Cx43介导氧化应激与心脏缺血后处理相关性研究

项目编号： No.30960131

项目类型： 地区科学基金项目

立项/批准年度： 2010

项目学科： 生物科学

项目作者： 钟国强

作者单位： 广西医科大学

项目金额： 26万元

中文摘要： 细胞膜和线粒体Cx43与细胞氧化应激及缺血预处理（IP）作用相关，缺血后处理（PC）减轻心肌缺血再灌注(I/R)损伤效益较IP更具临床实用性，但机制未明。假设细胞膜和线粒体Cx43介导氧化应激平衡是PC保护效应的重要因素。采用RNA干扰技术将Cx43mRNA在转录水平沉默，构建Cx43低表达SD大鼠离体心肌细胞缺氧/复氧再灌注模型、离体心脏灌流模型及活体模型，并用特异性膜转导蛋白阻滞剂和ROS清除剂干预，采用划痕染料示踪技术检测Cx43通道通讯，荧光定量PCR检测Cx43mRNA，Westernblot半定量Cx43和磷酸化Cx43水平，共聚焦显微镜观察细胞膜Cx43数量及排列变化，免疫电镜检测线粒体Cx43，荧光比色法测定线粒体活性氧水平，高效液相测定高能磷酸化合物，流式细胞仪检测细胞凋亡及坏死率，以探讨细胞膜和线粒体Cx43介导氧化应激与PC相关作用的分子生物学和组织解剖学机制。

中文关键词： 缝隙连接蛋白43；活性氧；缺血后处理；细胞膜；线粒体

英文摘要：

英文关键词： connexin 43；reactive oxygen species；ischemic postconditioning；sarcolemma；mitochondria