黑视素基因转染双极细胞治疗晚期视网膜色素变性

项目名称： 黑视素基因转染双极细胞治疗晚期视网膜色素变性

项目编号： No.81400422

项目类型： 青年科学基金项目

立项/批准年度： 2014

项目学科： 医药、卫生

项目作者： 游启生

作者单位： 北京市眼科研究所

项目金额： 23万元

中文摘要： 晚期视网膜色素变性(RP)光感受器消失殆尽，但内层视网膜结构相对完整，如何利用相对完整的内层视网膜修复患者视功能，不仅是个有意义的科学问题，更是个有意义的临床问题。本研究拟结合基因治疗和视网膜芯片思路，探讨将正常表达于内层视网膜部分神经节细胞对光敏感的黑视素OPN4基因转染至晚期RP小鼠视网膜双极细胞中，人为赋予双极细胞感光功能，以替代丢失的光感受器功能，从而修复小鼠视功能。实验设计包括体外和体内实验，体外培养人神经母细胞瘤细胞SHFY5Y，应用AAV.GFP摸索转染条件后将黑视素基因转染至SHFY5Y细胞，检测其是否具备感光功能。体内实验采用视网膜下注射AAV.GFP摸索最佳转染条件，再行AAV.OPN4转染目的基因于变性小鼠视网膜双极细胞中，应用激光共聚焦扫描显微镜，免疫组织化学染色,Western Blot等检测转染效率，检查瞳孔对光反射，行为实验等观察转染后小鼠视功能。

中文关键词： 视网膜色素变性；基因治疗；腺相关病毒；遗传性眼病；光遗传学

英文摘要： Retinitis pigmentosa (RP) is a severe blindness leading heritable ocular disease, for which no therapy is available up to date. For late stage RP, the photoreceptors are lost completely, all photoreceptor rescueing will fail. It is only possible to re

英文关键词： retinitis pigmentosa；gene therapy；Adeno associated virus；inheritable eye disease；optogenetics