自交不亲和信号传递因子ARC1相互作用蛋白的筛选及功能分析

项目名称： 自交不亲和信号传递因子ARC1相互作用蛋白的筛选及功能分析

项目编号： No.30900115

项目类型： 青年科学基金项目

立项/批准年度： 2010

项目学科： 生物科学

项目作者： 蓝兴国

作者单位： 东北林业大学

项目金额： 18万元

中文摘要： 自交不亲和性（SI）是植物采取的一种避免自交的策略，在长期进化过程中具有重要的作用。芸苔属SI反应的主要部位是柱头乳突细胞。当花粉中的SCR配体与柱头中的SRK受体特异性地识别后，激活SRK的胞内激酶域。ARC1，一个具有U-Box结构域的E3泛素连接酶，是SRK下游的一个正向调控因子，特异性地识别某些下游底物，通过26S蛋白酶体将其降解从而导致SI反应，但目前ARC1的下游底物尚不清楚。在本项研究中，通过构建柱头的酵母双杂交cDNA文库，利用酵母双杂交系统筛选ARC1相互作用的蛋白质；通过RACE方法获得基因全长并进行序列及表达分析；通过免疫共沉淀、pull-down、亚细胞共定位及生物信息学等方法，进行蛋白质间的相互作用及结构域分析；通过体外泛素化实验检测ARC1对筛选到的蛋白质泛素化的水平，免疫印迹的方法检测筛选到的蛋白质在授粉过程中的水平变化，从而阐释筛选到的蛋白质在SI上的功能。

中文关键词： 自交不亲和；柱头；ARC1；JDP1；蛋白质相互作用

英文摘要：

英文关键词： self-incompatibility；stigma；ARC1；JDP1；protein-protein interaction