苹果花粉无机焦磷酸酶在自交不亲和反应中的作用机制研究

项目名称： 苹果花粉无机焦磷酸酶在自交不亲和反应中的作用机制研究

项目编号： No.31171941

项目类型： 面上项目

立项/批准年度： 2012

项目学科： 农业科学

项目作者： 李天忠

作者单位： 中国农业大学

项目金额： 63万元

中文摘要： 蔷薇科果树属配子体自交不亲和（SI），受花柱S-RNase介导。前一基金通过苹果花柱S2-RNase C2HVC3区筛选花粉cDNA文库获得的无机焦磷酸酶基因（IP）片段能与S1-、S2-RNase互作，添加自我花柱蛋白粗提物（含S-RNase）培养花粉发现花粉管IP活性降低，初步推断IP可能受控S-RNase，参与SI反应。该项目在此基础上，首先通过RACE克隆基因全长，利用体外及双分子荧光互补实验（活体）验证其与S-RNase的互作关系，进行组织特异性分析与定位；通过添加诱导有活性的S-RNase及去除S-RNase的花柱蛋白粗提物等培养花粉分析S-RNase对IP活性影响，通过寡核苷酸转染、显性抑制及转基因实验证明IP对花粉管生长影响及亲和性变化，在添加诱导有活性的S-RNase培养P32标记的花粉后证明S-RNase导致IP磷酸化是否为其失活的原因。弄清IP在SI反应中的作用机制。

中文关键词： 苹果；自交不亲和；S-核酸酶；无极焦磷酸酶；tRNA氨酰化

英文摘要：

英文关键词： apple；self-incompatibility；S-RNase；MdPPa；tRNA aminoacylation