克隆牛重编程中核质互作分子机理的探讨

项目名称： 克隆牛重编程中核质互作分子机理的探讨

项目编号： No.31371486

项目类型： 面上项目

立项/批准年度： 2013

项目学科： 生物科学

项目作者： 曾凡一

作者单位： 上海交通大学

项目金额： 80万元

中文摘要： 动物克隆中的核-质相互作用对体细胞重编程起决定性作用，但具体机制不明。我们将从卵母细胞、供体细胞和核质互作多方面考察重编程的分子机理。本课题以活体取卵获得的遗传背景清晰且经线粒体DNA分型的牛卵母细胞为核受体进行核移植，以克隆效率有差异的同体、线粒体同型异体和异型克隆胚胎为模型，体外受精胚作为对照，研究不同核-质组合克隆胚胎的重编程情况。结合已建立的单胚胎极微量RNA（pg级）抽提技术和RNA线性扩增技术，采用牛基因组表达谱芯片研究同体、同型和异型克隆胚胎表达模式，通过生物信息学手段筛选差异表达基因，重点分析在重编程和核质互作中起重要作用的基因，设计特异的siRNA，在胚胎水平验证差异基因功能，揭示重编程的分子机制，构建克隆动物着床前胚胎发育过程中核质互作和表观遗传调控网络图，阐述两者之间的关系。

中文关键词： 体细胞核移植；线粒体DNA单倍型；重编程；单胚胎微量表达谱；芯片分析

英文摘要： Domesticated animals cloned by somatic cell nuclear transfer (SCNT) generally have poor developmental competency, with many abnormalities occurring in the course of development which may due to incomplete reprogramming of the nuclear genome and abnormal e

英文关键词： Somatic cell nuclear transfer；Mitochondrial DNA haplotype；reprogramming；single embryo expression pattern；microarray analysis