CRYAA基因DNA甲基化在年龄相关性白内障发病中的作用研究

项目名称： CRYAA基因DNA甲基化在年龄相关性白内障发病中的作用研究

项目编号： No.81200669

项目类型： 青年科学基金项目

立项/批准年度： 2013

项目学科： 医学二处

项目作者： 周鹏

作者单位： 复旦大学

项目金额： 23万元

中文摘要： 年龄相关性白内障（ARC）是全球首位致盲眼病。本项目组前期研究验证了αA晶状体蛋白（CRYAA）分子伴侣功能与ARC的发病密切相关，同时发现随着ARC病变程度加深，CRYAA蛋白表达量降低，其基因启动子区DNA甲基化程度明显增加，据此提出"随着年龄增加，CRYAA基因DNA甲基化程度增加，导致CRYAA表达降低，总的分子伴侣活性下降，出现白内障"的假说。本项目拟在白内障术中取不同类型、不同浑浊程度白内障前囊膜，以眼库中年龄匹配无明显白内障眼球的晶状体前囊膜为对照，提取基因组DNA，使用重亚硫酸盐测序法定量分析CRYAA基因DNA甲基化程度变化规律，检测CRYAA基因表达水平以进一步验证该假说，并在组织水平检测DNA甲基化抑制剂Zebularine的干预效果。从而阐明CRYAA基因DNA甲基化在ARC发病过程中的作用机制，并为ARC提出新的干预策略。

中文关键词： 白内障；DNA甲基化；αA晶状体蛋白；；

英文摘要： Age-related cataract (ARC) is the leading cause of blindness in the world. The molecular chaperone function of αA crystallin (CRYAA) plays an important role in maintaining the transparency of lens. Our preliminary study found that the DNA methylation of CRYAA gene promoter is significantly increased in ARC, and then proposed the hypothesis that "DNA methylation of CRYAA is increased with aging, leading to reduced CRYAA expression, declined total chaperone activity, and development of cataract". This project intends to take the anterior capsule of different type cataract, with anterior lens capsule from eyes of our eye bank without cataract with same age group as control. We will measure the DNA methylation level of CRYAA using bisulfite sequencing PCR, detect CRYAA gene expression level using RT-PCR and western blot, and reverse the DNA methylation using zebularine in the tissue level. The purpose of this project is to clarify the role of DNA methylation of CRYAA genes in the development of ARC, and propose a new intervention strategy for ARC.

英文关键词： cataract；DNA methylation；αA crystallin；；