灰葡萄孢菌肌糖磷脂酰神经酰胺合成酶基因内含子的结构与调节功能研究

项目名称： 灰葡萄孢菌肌糖磷脂酰神经酰胺合成酶基因内含子的结构与调节功能研究

项目编号： No.31160031

项目类型： 地区科学基金项目

立项/批准年度： 2012

项目学科： 微生物学、植物学

项目作者： 苟萍

作者单位： 新疆大学

项目金额： 36万元

中文摘要： 真核生物基因非编码序列结构及调控机制的研究是当今生物学研究的新领域，植物病源真菌内含子调控基因表达的知识还鲜为人知。利用已得到的灰葡萄孢菌肌糖磷脂酰神经酰胺(IPC)合成酶基因(AUR1)缺失内含子的突变株，测定AUR1的 mRNA表达量和IPC合成酶活力，确认内含子对AUR1表达的影响。构建缺失不同内含子序列的表达载体，转化灰葡萄孢菌，检测mRNA和IPC合成酶的表达量，筛选影响基因表达显著的内含子序列。生物信息学预测该序列中的调控元件，构建缺失调控元件和调控元件点突变表达载体，转化灰葡萄孢菌，检测mRNA和IPC合成酶活力，确定调控元件的序列和调控功能。在短梗霉素A存在和缺乏情况下，观察不同表达载体转化的灰葡萄孢菌的细胞形态，测定草酸和神经酰胺的量、纤维素和果胶酶活力，以及对果实感染的影响，明确内含子序列及其调控元件对细胞表型和致病力的影响，为鞘脂合成关键酶的调控研究奠定基础。

中文关键词： 灰葡萄孢菌；AUR1基因缺失内含子序列突变株；基因表达；细胞生长；酶活力

英文摘要：

英文关键词： Botrytis cinerea；mutants with intron sequences deleted of AUR1 gene；gene expression；cellular growth；enzymes activity