双链RNA病毒甲基转移酶活性位点的空间定位--冷冻电镜原子分辨三维重构

项目名称： 双链RNA病毒甲基转移酶活性位点的空间定位--冷冻电镜原子分辨三维重构

项目编号： No.31370736

项目类型： 面上项目

立项/批准年度： 2013

项目学科： 生物科学

项目作者： 刘红荣

作者单位： 湖南师范大学

项目金额： 80万元

中文摘要： 双链RNA病毒的RNA加帽过程是伴随mRNA转录的一个重要生化过程。其帽子具有防止RNA降解和确保病毒蛋白高效翻译的功能。双链RNA病毒的衣壳蛋白包含加帽所需要的两个甲基转移酶，其活性位点的空间定位对于揭示RNA加帽的生化机制和设计抗病毒药物有着非常重要的意义。冷冻电镜生物大分子三维重构方法不需要样品结晶，生物大分子保持了其生理状态，是研究病毒等生物大分子复合物的理想方法。本项目拟用呼肠孤病毒为模式生物，应用冷冻电镜三维重构方法测定处于加帽过程中的病毒原子分辨率（～3.0埃）三维结构，从而精确测定其处于加帽反应过程中的病毒甲基转移酶活性位点的空间位置及其周边氨基酸残基的属性，阐明RNA加帽的结构机制。同时，本项目拟通过改进重构数据处理的算法和软件来推进重构分辨率，因此也是一个冷冻电镜高分辨率三维重构技术革新上的重要攻关课题。

中文关键词： 冷冻电镜；双链RNA病毒；对称失配重构；基因组结构；RNA聚合酶

英文摘要： RNA capping of dsRNA viruses is an important biochemical process following mRNA transcription. The cap structure plays roles in protecting mRNA from degradation and ensuring efficient viral protein translation. Capsid proteins of the dsRNA viruses contain

英文关键词： cryo-electron microscopy；dsRNA virus；sysmetry-mismatch reconstruction；genomic structure；RNA-dependent RNA polymerase