草地贪夜蛾中肠上皮细胞和sf9细胞Vip3A结合受体的鉴定

项目名称： 草地贪夜蛾中肠上皮细胞和sf9细胞Vip3A结合受体的鉴定

项目编号： No.31371979

项目类型： 面上项目

立项/批准年度： 2013

项目学科： 农业科学

项目作者： 蔡峻

作者单位： 南开大学

项目金额： 80万元

中文摘要： 苏云金芽孢杆菌( Bacillus thuringiensis , Bt)毒素与受体的结合是影响毒力的关键。目前，已知的Cry类蛋白受体主要有氨肽酶N，类钙粘蛋白、碱性磷酸酶和糖脂等。现已有成功利用受体与Cry类蛋白相互作用的机理来提高毒力，延缓抗性的报道。Vip3A因其独特的杀虫机理和广谱的杀虫活性而被誉为第二代杀虫蛋白, 但其受体尚不清楚。本项目拟采用对Vip3A敏感的草地贪夜蛾中肠上皮细胞和sf9细胞来筛选鉴定Vip3Aa的受体。包括: 1）应用蛋白质组学技术鉴定与Vip3A蛋白结合的细胞膜蛋白；2)克隆、表达纯化结合的膜蛋白 3）在体外应用配体印迹技术，Pull-down技术验证；4）在体内应用RNAi技术和激光共聚焦扫描显微镜技术鉴定筛选到的蛋白是否就是受体。本项目为揭示Vip3Aa的杀虫机理提供新的科学依据；同时在提高Bt毒力，延缓抗性方面有着极大的指导意义和应用价

中文关键词： Vip3A；凋亡；清道夫C型受体；成纤维细胞生长因子受体；胞吞

英文摘要： The binding of Bacillus thuringiensis insecticidal toxins to its receptors is belived to be a critical step for its potency. At present, aminopeptidase N, cadherin, alkaline phosphatase and glycolpids have been identified as receptors of insecticidal crys

英文关键词： Vip3A；Apoptosis；scavenger receptor class C like protein (Sf-SR-C)；Fibroblast growth factor receptor(FGFR))；Endocytosis