精子介导的HIV-1基因在胚胎细胞中表达调控机制的探讨—#30456;关miRNA的筛选、鉴定与功能分析

项目名称： 精子介导的HIV-1基因在胚胎细胞中表达调控机制的探讨—#30456;关miRNA的筛选、鉴定与功能分析

项目编号： No.81172723

项目类型： 面上项目

立项/批准年度： 2012

项目学科： 医药、卫生

项目作者： 李练兵

作者单位： 重庆市人口和计划生育科学技术研究院

项目金额： 14万元

中文摘要： 分别从HIV/AIDS患者和正常男性取得精样，提取精子总RNA，利用基因芯片技术构建miRNA差异表达谱，经荧光实时定量PCR验证后，与"miRBase数据库"中的人、病毒miRNA进行比对，确定"表达差异显著的miRNA"所属类别，选择差异表达最显著的人、病毒miRNA各3个作靶miRNA。分别应用含靶miRNA模拟物和抑制剂模板序列的重组质粒，转染HIV/AIDS患者精子，再与金黄地鼠去透明带卵母细胞受精，分别收集"模拟物组"和"抑制剂组"的２-细胞胚胎，应用免疫荧光和Wersten Blot技术检测HIV-1基因的蛋白表达；根据检测结果, 分析靶miRNA与HIV-1蛋白表达的关系，验证靶miRNA是否对HIV-1基因的表达起调控作用。本研究目的在于，揭示由患者精子带入受精卵中的HIV-1基因在胚胎细胞中表达调控的分子机制，为寻找药物靶标和开发miRNA抗病毒新疗法奠定基础。

中文关键词： 精子；miRNA；HIV-1基因；差异表达；

英文摘要：

英文关键词： sperm；miRNA；HIV-1gene；differential expression；