改造调控蛋白设计D-塔格糖信号分子及其功能验证

项目名称： 改造调控蛋白设计D-塔格糖信号分子及其功能验证

项目编号： No.21172095

项目类型： 面上项目

立项/批准年度： 2012

项目学科： 数理科学和化学

项目作者： 唐双焱

作者单位： 中国科学院微生物研究所

项目金额： 60万元

中文摘要： 定向进化法是一种高效的蛋白质工程方法，包括构建目的基因的突变体文库，然后快速从突变体文库中筛选出少数具有某优良特性的突变体。目前构建数量庞大的突变体文库的方法已日趋成熟，最大瓶颈是缺乏高通量筛选方法。本课题将通过改造调控蛋白研制一种新颖的高通量筛选工具:信号分子。调控蛋白AraC将被改造成能特异性被D-塔格糖诱导并通过细胞荧光强度来反映细胞中D-塔格糖浓度的信号分子。为验证其功能，该信号分子将用作高通量筛选工具对L-阿拉伯糖异构酶进行定向进化法改造，提高该酶副催化反应产物D-塔格糖的产量。D-塔格糖是一种功能性甜味剂并对2型糖尿病具有可观疗效。该改造调控蛋白的方法可推广应用于定制结构相似的各种不同小分子化合物的信号分子，这些信号分子不仅将在研究化合物的生物合成中发挥重要作用，还可用于设计制作生物传感器或其他微量分析装置等。本课题对定向进化方法学研究和D-塔格糖生物合成研究都具有重要意义。

中文关键词： 定向进化；高通量筛选；调控蛋白；四氢嘧啶；生物合成途径

英文摘要：

英文关键词： Directed evolution；High-throughput screening；Regulatory protein；Ectoine；Biosynthetic pathway