胞膜-核膜双靶向定位系统提高超声微泡介导的外源基因转染效率的实验研究

项目名称： 胞膜-核膜双靶向定位系统提高超声微泡介导的外源基因转染效率的实验研究

项目编号： No.81201109

项目类型： 青年科学基金项目

立项/批准年度： 2013

项目学科： 影像医学与生物医学工程

项目作者： 陈茜

作者单位： 武汉大学

项目金额： 23万元

中文摘要： 超声和微泡定向传递系统（UMTD）虽有良好组织特异性和微毒性，但仍存在转染效率低的瓶颈。UMTD导致的声致孔隙作用虽能增加胞膜通透性，但基因被细胞摄取仍是随机的。如果使基因主动向细胞聚集，并先后与胞膜和核膜结合，就能使基因最大限度地进入细胞。因此我们设计了 "细胞膜特异性抗体-基因-细胞核定位信号"双靶向基因,使基因同时含有胞膜靶向性和胞核趋向性，再联合UMTD作用后增强的细胞内吞作用，促进基因入胞量及入核量，提高基因转染效率。实验分三部分：1 UMTD对胞膜和核膜通透性的影响：确定最佳超声微泡转染条件；2双靶向基因制备:以肽核酸PNA为桥梁制备含有膜特异性抗体和核定位信号肽NLS的双靶向基因；3 UMTD基因转导系统对双靶向基因在不同细胞系中转染效率的影响，检测双靶向基因的入胞与入核效率。藉此研究建立新的基因修饰方式，为提高UMTD介导的基因转染效率和临床基因治疗效果提供新的技术支持。

中文关键词： 微泡；超声；基因转染；核定位信号；肽核酸

英文摘要： Ultrasound and microbubbles targeted delivery systems (UMTD) are good tissue specificity and micro-toxicity, but there are still bottlenecks that transfection efficiency is low. Sonoporation improves cell membrane permeability, but it is random that cell

英文关键词： Ultrasound；microbubble；gene transfection；nuclear localization signal；peptide nucleic acid