猪雄性生殖干细胞转化为类胚胎干细胞过程中印记基因甲基化状态的研究

项目名称： 猪雄性生殖干细胞转化为类胚胎干细胞过程中印记基因甲基化状态的研究

项目编号： No.31172379

项目类型： 面上项目

立项/批准年度： 2012

项目学科： 畜牧学与草地科学、兽医学、水产学

项目作者： 余树民

作者单位： 四川农业大学

项目金额： 58万元

中文摘要： 已有研究证实动物雄性生殖干细胞（mGS）在适宜条件下能转化为具有胚胎细胞（ES）特性的多潜能细胞；印记基因甲基化状态及其稳定性对多潜能细胞分离建系具有重要作用，而在猪的研究还是空白。本研究拟用1~2月龄猪睾丸为材料，通过"两步法"消化睾丸组织，通过差速贴壁和免疫磁珠分选富集纯化猪mGS细胞并进行体外培养；将猪mGS转移至特定培养条件培养，使其转化为猪类ES细胞，利用免疫组化、RT-PCR检测细胞的标志分子表达谱、体内外分化潜能；采用甲基化敏感限制性内切酶和甲基化特异PCR（MSP）分析睾丸组织、猪mGS和猪类ES细胞的印记基因和多潜能性关键基因启动子区甲基化状态，阐明印记基因甲基化状态在猪mGS转化为类ES细胞中的作用，为转基因猪研究、猪精子生成、猪种资资源保存提供新的材料和途径。

中文关键词： 猪；睾丸；雄性生殖系干细胞；支持细胞；DNA甲基化

英文摘要：

英文关键词： Porcine；Testis；Male germline stem cells；Sertoli cells；DNA methylation