PXR-Cdk调控网络研究红豆杉中黄酮类成分与紫杉醇协同增效的分子作用机理

项目名称： PXR-Cdk调控网络研究红豆杉中黄酮类成分与紫杉醇协同增效的分子作用机理

项目编号： No.81202961

项目类型： 青年科学基金项目

立项/批准年度： 2013

项目学科： 医药、卫生

项目作者： 蔡大可

作者单位： 中山大学

项目金额： 20万元

中文摘要： 在本项目的前期研究中，体内实验表明红豆杉提取物具有高抗肿瘤作用；且其中黄酮类成分具有协助紫杉醇诱导PXR高表达的LS174T癌细胞的凋亡，并呈现量效关系。但其分子作用机理不明确。本项目拟研究黄酮类成分对PXR-Cdk信号网络的调控，并通过调控Bcl-2家族蛋白增强紫杉醇诱导的凋亡。首先，pSG5-hPXR质粒转染和PXR siRNA抑制手段构建PXR高表达和低表达LS174T细胞系，验证黄酮调控作用的PXR依赖性；应用过表达Cdk蛋白和siRNA干扰手段，验证PXR-Cdk相互作用。在2种细胞系中， Western blot技术检测不同药物组合方案对cdk1、cdk5、cyclinB、p35、Mcl-1、Bak的表达的差异；以及PXR和Mcl-1的磷酸化及降解水平的差异。并以TUNEL法检验黄酮类成分促进紫杉醇的细胞凋亡周期。最终以信号通路的相互作用阐述中药协同增效抗肿瘤的分子作用机理。

中文关键词： 紫杉醇；黄酮；协同增效；PXR；抗肿瘤

英文摘要： The results in preliminary research demonstrated that extract derived from Taxus significantly inhibites the growth of A549 in xenograft nude mice with low toxicity (LD50≥7.5g/kg).The result also indicated that the extract may be superior to the paclitaxe

英文关键词： Taxol；flavonoid；apoptosis；CDK；PXR