cGAS在介导pUC18-CpG免疫增强效果中的作用和机制探讨

项目名称： cGAS在介导pUC18-CpG免疫增强效果中的作用和机制探讨

项目编号： No.31402232

项目类型： 青年科学基金项目

立项/批准年度： 2014

项目学科： 农业科学

项目作者： 郭晓宇

作者单位： 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所

项目金额： 25万元

中文摘要： cGAS是近期报道的一种在激活先天免疫、调节适应性免疫中起重要作用的DNA胞质受体。前期研究发现，pUC18-CpG可显著提高猪口蹄疫灭活疫苗、蓝耳病活疫苗的免疫保护效果；然而，除CpG DNA膜受体TLR9外，pUC18-CpG是否通过cGAS发挥其佐剂效应尚未有报道。本研究假设cGAS参与介导pUC18-CpG的免疫增强作用，由此克隆猪cGAS基因，表达、纯化cGAS蛋白；以生物素-亲和素系统验证cGAS体外结合DNA的能力，免疫印迹法间接检测其生物学活性；构建HEK293T-STING细胞系，利用ELISA、RNAi等方法研究pUC18-CpG是否激活与cGAS相关的信号通路，定量PCR检测细胞中Ⅰ型干扰素mRNA转录水平；利用RNA-Seq分析猪PBMCs中cGAS介导的Ⅰ型干扰素相关基因转录情况。综合分析研究结果，初步阐明cGAS在pUC18-CpG免疫增强效果中的作用和机制。

中文关键词： 环鸟苷酸-腺苷酸合成酶；模式识别受体；抑制剂；佐剂；表达谱

英文摘要： In recent studies, cGAS was found to be a novel cytosolic DNA sensor that activates innate immunity, and controls the progress of adaptive immunity. Our previous studies have shown that pUC18-CpG could greatly enhance the efficacy of a swine FMD killed va

英文关键词： cGAS；pattern recognition receptors；inhibitor；adjuvant；transcriptome