斑马鱼体细胞核移植胚胎再程序化重要基因的克隆与分析

项目名称： 斑马鱼体细胞核移植胚胎再程序化重要基因的克隆与分析

项目编号： No.30900853

项目类型： 青年科学基金项目

立项/批准年度： 2010

项目学科： 轻工业、手工业

项目作者： 罗大极

作者单位： 武汉大学

项目金额： 21万元

中文摘要： 核移植后重构胚的重编程研究一直是一个经典并极富挑战性的课题。虽然多种动物已被成功克隆，但是获得克隆动物的成功率不足5%，且重构胚普遍存在遗传和发育方面的问题。越来越多的实验结果提示重构胚的诸多问题都可归咎于核移植后发生了不完全的再程序化，但其分子机制尚不清楚。申请者前期研究检测到囊胚期败育的体细胞重构胚96个基因相对于受精胚异常表达，提出核移植后重构胚早期发育的再程序化过程中可能存在几个关键调控因子。本项目拟以斑马鱼体细胞重构胚为模型，研究核移植后重构胚早期发育的再程序化分子机制。采用抑制性差减杂交技术大规模筛选核移植后原肠期shield stage体细胞重构胚相对于受精胚差异表达的基因谱；通过生物信息学分析和体外共转染特定因子技术鉴定2-4个再程序化因子，并初步研究其在重构胚早期发育的再程序化调控网络中的功能；以期为分子水平揭示斑马鱼体细胞重构胚早期发育的再程序化机制提供理论依据。

中文关键词： 斑马鱼；核移植；重编程；Dome stage；Shield stage

英文摘要：

英文关键词： Zebrafish；Nuclear transplantation；Reprogramming；Dome stage；Shield stage