项目名称: 基于单细胞分析技术探讨口蹄疫病毒持续感染机制
项目编号: No.31370185
项目类型: 面上项目
立项/批准年度: 2013
项目学科: 生物科学
项目作者: 郑从义
作者单位: 武汉大学
项目金额: 82万元
中文摘要: 口蹄疫是世界动物卫生组织列为必报动物疫病之首的重大动物传染病。口蹄疫病毒(FMDV)持续感染是口蹄疫爆发的主要原因。因此,解析其持续感染机制对防控口蹄疫爆发至关重要。但由于传统研究技术的局限,迄今对FMDV持续感染机制仍知之甚少。本项目拟采用荧光激活流式单细胞分选和单细胞荧光定量 RT-PCR等新技术,检测FMDV持续感染单细胞的感染效率及基因组复制动力学,揭示其病毒载量在单个宿主细胞中分布极端不均匀而导致细胞异质化程度加重的本质;利用单细胞分离培养技术从FMDV持续感染异质化细胞群体中分离易感染、持续感染和不感染3类同质细胞,分析细胞的周期时相及质膜特性变化,探讨FMDV持续感染加重宿主细胞异质化进程的机制;借助RNA干扰和靶向基因敲除技术,在单细胞水平上研究宿主细胞调控因子EBP1和P4HA2f基因的差异表达与功能,从更精细的尺度上探讨FMDV形成持续感染的调控机制。
中文关键词: 口蹄疫病毒;持续感染;单细胞分析;流式细胞荧光分选技术;
英文摘要: The Foot-and-Mouth Disease (FMD), a highly contagious viral disease affecting mammals, has been listed as the top immediately notifiable disease by the World Organization for Animal Health (OIE). The primary cause of FMD outbreak is persistent infection b
英文关键词: Foot-and-Mouth Disease Virus;persistent infection;single cell analysis;Fluorescence activated Cell Sorting;